Fluorescentie-in-situhybridisatie bij het onderzoek naar chromosomale afwijkingen

- Classical cytogenetics has a low resolving power and allows analysis of dividing cells only.

- In fluorescence in situ hybridization (FISH), a DNA fragment is stained with a fluorescent marker, after which this fragment is brought into contact with a patient's DNA. The stained fragment can bind to a corresponding fragment, revealing its presence or absence.

- Using FISH, every desired DNA sequence (from a whole chromosome to one gene) can be stained. In this way it is also possible to diagnose microdeletion syndromes, such as the Williams syndrome, the DiGeorge syndrome and submicroscopial chromosome anomalies that play a part in mental handicaps.

- FISH also allows analysis of non-dividing cells. In this way it is possible for instance rapidly to examine uncultured amniotic fluid cells for the commoner trisomies or to find foetal erythrocytes in a pregnant woman's blood. It is also possible to demonstrate tumour-specific breaking points.

- By application of FISH to microarrays it is possible to study a large number of genes simultaneously for the presence of a particular number of DNA sequences linked to a clinical abnormality.

Samenvatting

- Klassieke cytogenetica heeft een laag oplossend vermogen en alleen delende cellen kunnen ermee worden geanalyseerd.

- Bij fluorescentie-in-situhybridisatie (FISH) wordt een DNA-fragment van een fluorescerende merkstof voorzien, waarna dit fragment in contact wordt gebracht met DNA van een patiënt. Het gekleurde fragment kan zich binden aan een overeenkomstig stukje, waardoor de aan- of afwezigheid hiervan zichtbaar wordt.

- Met behulp van FISH kan elke gewenste DNA-sequentie (van een heel chromosoom tot één gen) worden aangekleurd. Hiermee kunnen ook microdeletiesyndromen worden gediagnosticeerd, zoals het Williams-syndroom en het DiGeorge-syndroom, en submicroscopische chromosoomafwijkingen die een rol spelen bij verstandelijke handicaps.

- Met FISH kunnen ook niet-delende cellen worden geanalyseerd. Hierdoor is bijvoorbeeld snel onderzoek mogelijk van ongekweekte vruchtwatercellen op de meest voorkomende trisomieën of van foetale rode bloedcellen in het bloed van een zwangere vrouw. Ook kunnen tumorspecifieke breukpunten worden aangetoond.

- Met behulp van FISH op microarrays kunnen grote aantallen genen tegelijkertijd worden bestudeerd op de aanwezigheid van een bepaald aantal DNA-sequenties die verband houden met een klinische afwijking.